宫颈癌筛查中高危型HPV检测的应用进展

宫颈癌筛查中高危型HPV检测的应用进展

黎小红 黄卫玲 钟惠仪

广州市增城区中医医院妇科 511300

项目类别： 2021年度增城区民生科技项目

项目编号：2021ZCMS06

（项目名称：高危型HPV整合精准筛查对宫颈癌早期筛查应用意义的研究）

 摘要：宫颈癌相对常见，且死亡率高。目前采取的高危型HPV检测方式简单、有效，但仍会遇到一些问题，如检测方式单一，无法立体化呈现受检者的整体状况。基于此，需探究高危型HPV检测的未来发展方向，尝试与其他检测方式联合检查，得出更加准确、全面的检测结果。文章对宫颈癌筛查中高危型HPV检测的应用进展进行了综述。

关键词：宫颈癌筛查；高危型HPV检测；应用

引言：宫颈癌作为一种常见的女性恶性肿瘤，发病率一直居高不下，严重损害了女性的身体健康，且在相关研究中显示，女性宫颈癌的患病率与死亡率仍呈每年上升趋势，并有年轻化的态势[1]。在宫颈癌筛查中，引入高危型HPV检测手段，能直接确定宫颈癌高危因素，在提升早期诊断率的同时，对其系统化治疗有着较强的支撑作用[2]。而就如何灵活地应用高危型HPV检测技术，不同学者、专家存在不同态度。本文深入分析了宫颈癌筛查中高危型HPV检测的应用进展。

1 高危型HPV检测

高危型HPV检测，即用于检测人乳头状瘤病毒（HPV）的检测方法，可细化出临床症状分析、宫颈活检、阴道镜检查、宫颈脱落细胞学检查等，高危型HPV持续感染与宫颈癌有着密不可分的关系，故而在临床上建议能积极检测高危型HPV，应对可能出现的意外情况。常规高危型HPV检测流程包括：取样，医生用窥阴器打开阴道，让宫颈充分暴露，再将医用毛刷放在患者子宫颈管鳞柱状交界处，旋转几圈小刷子，提取脱落的黏液、细胞；HPV筛查，获取样本后，放置到培养基中送入实验室，利用PCR检测方法完成HPV筛查；等待检查结果，实验室结合检查数据，进行HPV低危、高危分型，并详细到亚型，如HPV18型、HPV16型，在检验报告中标注结果数据，以供后续治疗参考。

2 宫颈癌筛查中高危型HPV检测的应用进展

2.1 高危型HPV检测联合TCT检测

TCT检测指的是宫颈脱落细胞筛查，经常与高危型HPV检测联合应用，以此来提升宫颈癌筛查效果。刘繁杰[3]在研究中针对35-65岁的妇女宫颈癌早期筛查提出了高危型HPV检测联合TCT检测方法，检查前一周，受检者做好相关准备，如不冲洗阴道、不用阴道内药物，禁止性生活等；TCT检测时，受检者保持膀胱截石位，充分暴露出宫颈结构，用宫颈细胞刷在宫颈外口与鳞柱状上皮交界处取出标本，清洗黏液、白带，进行细胞学检测；高危型HPV检测时，先在受检者阴道中放入张开器，在黏膜、宫颈口取样，送到HPV检测中心检测，对比单独的TCT检测或者HPV检测，联合检测机制的检出率更高，在10%左右，这说明HPV+TCT联合检测机制在宫颈癌早期筛查中具备实际意义，能有效保障女性健康。路理娜[4]在HPV+TCT联合检测研究时，得出了同样的研究结果，只是针对的女性受检者群体更广，下至20岁，上至65岁，在检查前提醒女性注意事项，勿冲洗阴道、禁止同房等，在实际检测操作时亦有一些不同，如在TCT检测时，在受检者宫颈中放置专用采集刷，旋转4—6次后采集，让采集的样本更加均匀；HPV检测时采取的是PCR（反向聚合酶链式反应），用于检测45分型、51分型、52分型等。总结以上的检测研究成果，可以肯定的是联合检测方式的可用性，但仍存在一些局限性，如刘繁杰研究中年龄的局限性，路理娜研究中联合检测过程的简略性，使得检测结果仍有较大的可商榷空间，需在后续的相关研究中进一步证实。

2.2 HPV亚型与病毒载量联合检测

病毒载量检测指的是检测受检者每毫升血液中病毒的数量来判定其患病严重程度，与高危型HPV联合应用，为宫颈癌病变筛查、诊断治疗提供支持。庄加梅[5]在联合检测研究中针对140名患者进行了分组讨论研究，对照组只是进行了常规的HPV检查，实验组在完成HPV检查后，配合进行病毒载量检测，引入HCII筛查法，排除其他可能感染因素，在实验室裂解、杂交、扩增、纯化，具体流程严格按照检测指示开展，利用核酸提取仪提取患者标本的DNA，样本、阴性参照物按照每孔2μL的标准加入八连管中，再注入2μL阳性对照反应液；确定PCR反应条件（变性温度93-94℃，1min；退火温度45-68℃；延伸温度，70-75℃），在50℃温度标准下，在5min内进行UNG酶处理；95℃环境下，进行10min的预变形处理；95℃环境下，经10s变性；58℃环境下，进行退火、延伸、荧光检测处理，在40s内完成45次循环，得出相关检测结果。就检测结果而言，HPV亚型与病毒载量联合检测能得出更加精确的数据信息，并能鉴别宫颈癌的病理分级、分期，这是单一HPV检测无法达到的效果，且病毒检测方式在长久的发展中已经比较完善，且基本不会对患者产生负面影响。王芳[6]等在研究时只是研究对象数量略有增加，达到180人，其他如HPV、病毒载量检测方法、流程大概一致，最后对比各组受检者的病理结果，但在列举排除标准时相对简略，如未确定癌细胞是否向远处转移，使得其研究结果可能备受质疑，但整体研究过程、结果分析相对严谨，且得出的结果与庄加梅相同。在分析以上两项研究中可知，在HPV亚型与病毒载量联合检测前，需选定检测对象、列出纳入标准、排除标准，选择检测方法，两组研究都肯定了联合检测的价值，说明这种检测方式确实可行、有效，但两组却均未考虑不同受检者年龄、地区、情绪等可能带来的影响，这需要在后续的研究中对其进行完善，并重新梳理研究过程，如参考相关检测指标、规范等，更新检测方法，或者引入更加先进的检测装置，确定不同阶段的研究任务，让联合检测更能经得起推断。

2.3高危型HPV检测联合患者身体产物检测

在患上宫颈癌后，患者身体中很多的产物会出现变化，结合这些产物变化，判定高危型HPV检测的准确度。叶永生[7]等在研究中提出高危型HPV分型联合宫颈分泌物PKM2、Stat3检测，其中高危型HPV分型为HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、66、68，再进行宫颈活检，划分为以下几种情况：正常、宫颈上皮内瘤变I级、宫颈上皮内瘤变Ⅱ级、宫颈上皮内瘤变III级、宫颈癌。这种联合诊断方式，为宫颈癌高风险群体快速检测积累了宝贵的经验。郝栋栋等在联合研究中提出高危型HPV阳性患者血清中HDAC6和Hsp90检测，在完成HPV检测后，通过酶联免疫吸附试验，采集患者清晨时5ml静脉血，观察其中HDAC6和Hsp90含量，掌握受检者的病情发展情况，提示患者目前所处的状态，对比单一的HPV检测方式，更加直观、具体、准确。总结以上两项研究成果，肯定其中提出的研究思路具备较大可行性，为高危型HPV检测未来的发展方向指明了方向，但在应用这种联合检测机制时，需要综合评定患者目前的状态、病症特征等，从而能选择相对合理的身体产物加以检测，精简检测进程，避免做较多无用功，提升检测水平。

2.4高危型HPV整合筛查

HPV DNA与人基因组的整合是宫颈癌发病进程中的关键分子事件，且HPV DNA整合会直接引发患者相关基因表达、遗传物质结构的变化，造成患者体内细胞异常凋亡、增殖失控，诱发癌变，基于此，可将HPV DNA与人基因组的整合情况作为宫颈癌筛查的主要条件，评估患者此时状态。在实际筛查中，灵活应用专利项目“与宫颈癌发生相关的HPV整合的基因位点及其应用”，再结合探针杂交捕获技术发现患者体内特定区域序列改变信息，利用ILM平台完成高通量测序；通过生物信息学分析方法对检查人员样本展开HPV感染亚型分析，得出13种高危型别（HPV-16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68）及5种中危型别（HPV-26、53、66、73、82），并能比较精确地判断此时HPV DNA与检查人员DNA的整合状况。毫无疑问的，这种检测方式具备较大可行性，且准确率较高，能达到96%左右，优势主要表现在：高危型HPV整合筛查具备更高的特异性、敏感性，能比较准确、快速的发现其他检测方式难以发现的病症特征或者序列改变，并能实现HPV阳性患者精准分流；分析这种筛查方式的临床意义，体现在：能比较精确的评估宫颈癌及癌前病变进展风险，从而实现对癌症的提前干预、治疗，并指导患者积极的调整治疗方案、生活方式等；高危型HPV整合筛查，能作为阴道镜/病理检测的有效补充，扩大筛查范围，提升筛查准确率，协助医生进一步完善相关治疗方案，并对相关临床研究具备较好的辅助作用。

3结语

高危型HPV检测在宫颈癌筛查中比较常用，具备较好的应用效果。研究宫颈癌筛查中高危型HPV检测的应用进展，分析高危型HPV检测与其他检测方法联合检测的具体效果，总结应用方法，指导检测进程。研究过程仍有一定不足之处，如理论性较强，缺乏实践探究，需在后续的研究中继续完善。

参考文献：

[1]李小华，门楠，李莹莹，等.高危型HPV病毒载量在不同年龄段宫颈癌筛查中的应用研究[J].中华保健医学杂志，2023，25(2):200-202.

[2]周元元.高危型HPV检测及TCT检查在宫颈癌筛查中的应用分析[J].中文科技期刊数据库（文摘版）医药卫生，2023，16(12):33-35.

[3]刘繁杰.TCT联合HPV检测应用于妇女早期宫颈癌筛查作用分析[J].实用妇科内分泌电子杂志，2024，11(15):119-121.

[4]路理娜.按高危型HPV检测及TCT检查在宫颈癌筛查中的应用分析[J].中文科技期刊数据库（引文版）医药卫生,2024,16(7):91-94.

[5]庄加梅.探讨高危型HPV亚型与病毒载量检测对宫颈癌筛查的效果[J].中外女性健康研究，2023，32(2):87-89.

[6]王芳，李卫民，刘艳丽，等.高危型HPV亚型及病毒载量检测对宫颈癌筛查的价值探究[J].实用癌症杂志，2020，35(4):647-650.

[7]叶永生，徐燕，孙君华，等.高危型HPV分型联合宫颈分泌物PKM2、Stat3在宫颈癌筛查中的意义[J].分子诊断与治疗杂志，2024，16(1):98-101.

[8]郝栋栋，王晓娟，高凤春，等.高危型HPV阳性患者血清中HDAC6和Hsp90联合检测在宫颈癌前病变诊断中的临床意义[J].中国性科学，2024，33(3):82-87.